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使用對照品來鑒別色譜分離物

在色譜鑒別試驗(yàn)中,利用對照品對色潛分離物進(jìn)行鑒別是常用的色譜定性方法。其原理基于相同的化臺物在相同的色譜條件(流動相組成、色譜柱和柱溫等)下,具有完全相同的特定色 譜保留行為。通常在相同的色譜條件下,如果被測化臺物和對照品具確相同的保留值,就可以初步認(rèn)為,被測化臺物與對照品為相同物質(zhì)。藥典等藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的色譜鑒別法都足以此為依據(jù)的。宴際測定中,應(yīng)首先分別測定對照品和供試品的色譜保留時間。宴踐中可能會遇到多種情況,現(xiàn)舉例分別介紹如下:

注意:當(dāng)實(shí)驗(yàn)中初步發(fā)現(xiàn)供試品和對照品的保留時間略冉不同時.首先應(yīng)確定這種差異不是由于供試品和對照品的組成、濃度等的差異所致。簡單的排除方法是將供試品和對照品等比例混合進(jìn)樣,觀察在相同色譜條件下是否能分離出兩個色譜峰。如確有兩個色譜峰出現(xiàn),則可吼肯定供試品和對照品的保留時間不同,反之,不能肯定兩者的保留時間不同。

嚴(yán)格地說,根據(jù)某一特定色譜條件下供試品和對照品的保留時間相同.就判斷兩者為相同物質(zhì)仍具有一定的風(fēng)險性。如需要進(jìn)一步確定供試品和對照品相同,應(yīng)根據(jù)對照品的特性,選擇不同的色 譜條件(通常選掙不同的流動相),進(jìn)一步比較供試品和對照品在不同色譜條件下保留值的變化是否相同。如對有機(jī)酸堿化合物,應(yīng)比較流動相pH值在其曲左右變化時保留值的變化;對非極性化舍物.應(yīng)比較其保留值隨流動耜強(qiáng)溶劑改變的變化規(guī)律。如果多次改變流動相的組成,供試品和對照品的保留值均完全一致,則可進(jìn)一步肯定供試品和對照品為相同物質(zhì)。

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